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Validierung von gesexten Rinderspermien mittels quantitativer PCR
Die Auftrennung von X- und Y-tragenden Rinderspermien mittels Durchflusszytometrie ermöglicht die Auswahl des Geschlechts der Kälber.

Neben höheren Kosten und reduzierter Trächtigkeitsrate hängt der breite Einsatz gesextem Spermas bei landwirtschaftlichen Nutztieren von der Reinheit der Trennung ab. Deren Überprüfung verlangt ein zuverlässiges Verfahren. Deshalb wurde eine quantitative PCR erstellt, welche den Anteil männlicher Zellen aufgrund des Verhältnisses zwischen der Amplifizierung einer SRY Sequenz und einer Sequenz eines autosomalen Genes (MSHR) berechnet. Unsere Resultate zeigten eine stabile Amplifizierung von SRY auf 100 bis 1 ng genomischer DNS, was ein Nachweis von 1% männlicher Zellen ermöglicht, wenn 100 ng der Zielsequenz verwendet wird. Die Effizienz der MSHR und der SRY Amplifizierung war unterschiedlich und wurde deshalb mit der Differenz der Mittelwerte korrigiert. Das Verhältnis von männlichen zu weiblichen Spermien in nicht-aufgetrenntem Sperma wurde zuverlässig bestimmt. Die Verhältnisse in gesexten Spermien lagen unterhalb der erwarteten Werte. Die Untersuchung zeigt, dass die quantitative PCR eine gute Methode zur Untersuchung von gesexten Sperma ist, aber für die jeweiligen Proben optimiert werden muss.


Joerg, H., Asai, M., Graphodatskaya, D., Janett, F. & Stranzinger, G. (2004)Validating bovine sexed semen samples using quantitative PCR.Journal of Animal Breeding and Genetics 121 (3), 209-215


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